反相填料是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合極性較弱官能團(tuán)的鍵合相,常用類型包括C18、C8、C4、苯基柱等,其核心原理是通過(guò)疏水相互作用實(shí)現(xiàn)分子分離,廣泛應(yīng)用于藥物分析、生命科學(xué)及工業(yè)制備領(lǐng)域。
反相填料核心組成:
基質(zhì)材料
以高純度硅膠為基質(zhì),通過(guò)化學(xué)修飾(如鍵合烷基鏈、苯基等)形成疏水性表面。例如:
C18填料:鍵合18個(gè)碳原子的長(zhǎng)鏈烷基,疏水性強(qiáng),適用于非極性到中等極性化合物(如抗生素、類固醇)的分離。
C8填料:鍵合8個(gè)碳原子的短鏈烷基,疏水性較弱,保留能力低于C18,但分離速度更快,適合極性較大的化合物(如某些藥物中間體)。
苯基柱:表面修飾苯基基團(tuán),對(duì)芳香化合物具有選擇性,可通過(guò)π-π相互作用分離多環(huán)芳烴等。
分離機(jī)制
基于疏水相互作用:當(dāng)樣品分子進(jìn)入色譜柱時(shí),非極性部分與填料表面的烷基鏈結(jié)合,極性分子則隨流動(dòng)相(如水-甲醇混合液)優(yōu)先洗脫。通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相中有機(jī)溶劑比例,可控制分子保留時(shí)間,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)分離。